Arten von Antikörpertests

HIV-Immunoassay-Technologie

IV-Immunoassays, die auf unterschiedlichen Konstruktionsprinzipien beruhen, werden im Allgemeinen in "Generationen" eingeteilt:

• 1. Generation & 2. Generation (indirekte) Enzymimmunoassays (ELISA)/Enzymimmunoassays (EIAs)
  • Plasma oder Serum wird in antigenbeschichtete Vertiefungen gegeben, die virales Lysat (Assays der ersten Generation) oder rekombinante HIV-Proteine oder synthetische Peptide (Assays der zweiten Generation) enthalten
    • Wenn Anti-HIV-IgG in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Antigene. Anschließend wird ein Enzym, das mit einem Anti-HIV-IgG-Antikörper verbunden ist, in die Vertiefung gegeben (das sich an das Anti-HIV-IgG bindet). Schließlich wird ein Farbreagenz hinzugefügt.
      • Eine Farbveränderung zeigt das Vorhandensein von Anti-HIV-IgG in der Probe an.
        
        
• "Sandwich"-ELISA der 3. Generation
  • Die mit Antigen beschichtete Vertiefung enthält rekombinante Proteine oder synthetische Peptide. Enthält die Probe Anti-HIV-IgG- und IgM-Antikörper, so binden diese an das Antigen
    • ein an das HIV-Antigen gekoppeltes Enzym wird in die Vertiefung eingebracht (anstelle des Anti-IgG-Antikörpers), das an das Anti-HIV-IgG und -IgM bindet
    • ein Farbreagenz wird zugegeben, und eine Farbveränderung zeigt das Vorhandensein von Anti-HIV-IgG und IgM in der Probe an
  • im Vergleich zu den Tests der 1. und 2. Generation nützlich für die frühzeitige Erkennung einer Antikörperreaktion, da sie sowohl IgM als auch IgG nachweisen
    
    
• ELISA der 4. Generation "Kombination"
  • die Vertiefungen sind mit HIV-Antigen und p24-Antikörper beschichtet
    • HIV-Antikörper in der Probe binden sich an das Antigen, während Anti-p24-Antikörper sich an das freie p24 binden
    • im Schritt des Enzymnachweises wird sowohl enzymgebundenes HIV-Antigen als auch enzymgebundener p24-Antikörper zugegeben
    • ein Farbwechsel nach Zugabe des Farbreagenzes zeigt das Vorhandensein von entweder Anti-HIV-Antikörpern oder p24-Antigen an
      • 2 verschiedene Fluoreszenzmarker können für den unabhängigen Nachweis von p24-Antikörper oder HIV-Antigen verwendet werden.
  • im Vergleich zu den bisher verfügbaren Assays weisen die EIAs der 4. Generation p24-Antigene nach, was eine noch frühere Erkennung einer HIV-Infektion ermöglicht (1)

Referenz:

• (1) Daskalakis D. HIV-Diagnosetests: Entwicklung der Technologie und Teststrategien. Top Antivir Med. 2011;19(1):18-22.