Tipos de pruebas de anticuerpos

Tecnología de inmunoensayo del VIH

Los inmunoensayos del VIH basados en diferentes principios de diseño se agrupan generalmente en "generaciones":

• Ensayo inmunoenzimático (ELISA)/enzimoinmunoanálisis (EIA) de 1ª generación y 2ª generación (indirectos)
  • se añade plasma o suero a pocillos recubiertos de antígeno que contienen lisado viral (ensayos de primera generación) o proteínas recombinantes del VIH o péptidos sintéticos (ensayos de segunda generación)
    • si hay IgG anti-VIH presente en la muestra, se unirá a los antígenos. A continuación, se añade al pocillo una enzima unida al anticuerpo IgG anti VIH (que se une a la IgG anti VIH). Por último, se añade un reactivo de color.
      • Un cambio de color indica la presencia de IgG anti-VIH en la muestra.
        
        
• ELISA "sandwich" de 3ª generación
  • el pocillo recubierto de antígeno contiene proteínas recombinantes o péptidos sintéticos. Si la muestra contiene anticuerpos IgG e IgM contra el VIH, se unirá al antígeno
    • se introduce en el pocillo una enzima ligada al antígeno del VIH (en lugar del anticuerpo anti-IgG) que se une a los anticuerpos IgG e IgM contra el VIH
    • se añade un reactivo coloreado y, si se produce un cambio de color, indica la presencia de IgG e IgM anti-VIH en la muestra
  • útil en la detección precoz de la respuesta de anticuerpos en comparación con las pruebas de 1ª y 2ª generación, ya que detectan IgM además de IgG
    
    
• ELISA "combinado" de 4ª generación
  • los pocillos están recubiertos con antígeno del VIH y anticuerpo p24
    • los anticuerpos del VIH de la muestra se unen al antígeno, mientras que los anticuerpos antip24 se unen al p24 libre
    • en el paso de detección enzimática, se añaden tanto el antígeno del VIH ligado a la enzima como el anticuerpo p24 ligado a la enzima
    • un cambio de color tras la adición del reactivo de color indica la presencia del anticuerpo anti-VIH o del antígeno p24
      • pueden utilizarse 2 etiquetas fluorescentes diferentes para la detección independiente del anticuerpo p24 o del antígeno del VIH.
  • en comparación con los ensayos disponibles anteriormente, los EIA de 4ª generación detectan los antígenos p24, lo que permite una detección aún más precoz de la infección por VIH (1)

Referencia:

• (1) Daskalakis D. HIV diagnostic testing: evolving technology and testing strategies. Top Antivir Med. 2011;19(1):18-22.