HIV-Immunoassay-Technologie
IV-Immunoassays, die auf unterschiedlichen Konstruktionsprinzipien beruhen, werden im Allgemeinen in "Generationen" eingeteilt:
- 1. Generation und 2. Generation (indirekte) Enzymimmunoassays (ELISA)/Enzymimmunoassays (EIAs)
- Plasma oder Serum wird in antigenbeschichtete Vertiefungen gegeben, die virales Lysat (Assays der ersten Generation) oder rekombinante HIV-Proteine oder synthetische Peptide (Assays der zweiten Generation) enthalten
- Wenn Anti-HIV-IgG in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Antigene. Anschließend wird ein Enzym, das mit einem Anti-HIV-IgG-Antikörper verbunden ist, in die Vertiefung gegeben (das sich an das Anti-HIV-IgG bindet). Schließlich wird ein Farbreagenz hinzugefügt.
- Eine Farbveränderung zeigt das Vorhandensein von Anti-HIV-IgG in der Probe an.
- "Sandwich"-ELISA der 3. Generation
- Die antigenbeschichtete Vertiefung enthält rekombinante Proteine oder synthetische Peptide. Enthält die Probe Anti-HIV-IgG- und IgM-Antikörper, so binden diese an das Antigen
- ein an das HIV-Antigen gekoppeltes Enzym wird in die Vertiefung eingebracht (anstelle des Anti-IgG-Antikörpers), das an das Anti-HIV-IgG und -IgM bindet
- ein Farbreagenz wird zugegeben, und eine Farbveränderung zeigt das Vorhandensein von Anti-HIV-IgG und IgM in der Probe an
- im Vergleich zu den Tests der 1. und 2. Generation nützlich für die frühzeitige Erkennung einer Antikörperreaktion, da sie sowohl IgM als auch IgG nachweisen
- ELISA der 4. Generation "Kombination"
- die Vertiefungen sind mit HIV-Antigen und p24-Antikörper beschichtet
- HIV-Antikörper in der Probe binden sich an das Antigen, während Anti-p24-Antikörper sich an das freie p24 binden
- im Schritt des Enzymnachweises werden sowohl das enzymgebundene HIV-Antigen als auch der enzymgebundene p24-Antikörper hinzugefügt
- ein Farbwechsel nach Zugabe des Farbreagenzes zeigt das Vorhandensein von entweder Anti-HIV-Antikörpern oder p24-Antigen an
- 2 verschiedene Fluoreszenzmarker können für den unabhängigen Nachweis von p24-Antikörper oder HIV-Antigen verwendet werden.
- im Vergleich zu den bisher verfügbaren Assays weisen die EIAs der 4. Generation p24-Antigene nach, was eine noch frühere Erkennung einer HIV-Infektion ermöglicht (1)
Referenz:
- Centers for Disease Control and Prevention. Labortests für die Diagnose einer HIV-Infektion: Aktualisierte Empfehlungen. Jun 2014 [Internetveröffentlichung].