Concentración de sustrato

La velocidad de una reacción catalizada por una enzima aumenta hasta alcanzar una velocidad máxima, Vmax, al aumentar la concentración de sustrato. Vmax representa la saturación de la enzima con sustrato. Km, la constante de Michaelis, representa la concentración de sustrato que produce la mitad de Vmax. Es una medida de la afinidad de la enzima por su sustrato: cuanto menor es Km, mayor es la afinidad.

En la práctica, esto significa

• deben utilizarse concentraciones elevadas de sustrato cuando se compruebe la actividad in vitro de una enzima
• los valores Vmax y Km pueden determinarse in vitro e in vivo para comparar la contribución de una enzima determinada a una reacción metabólica específica
• un gráfico del recíproco de la concentración de sustrato (eje x) frente al recíproco de la velocidad de reacción (eje y) puede dar Vmax -el recíproco de la intersección del eje y- y Km -el recíproco negativo de la intersección del eje x-. Esto se denomina gráfico de Lineweaver-Burk.