Los anticuerpos son proteínas producidas por los linfocitos B del sistema inmunitario en respuesta a proteínas extrañas, denominadas antígenos.
- los anticuerpos funcionan como marcadores, uniéndose al antígeno para que las moléculas de éste puedan ser reconocidas y destruidas por los fagocitos
- la parte del antígeno a la que se une el anticuerpo se denomina epítopo
- una secuencia corta de aminoácidos que el anticuerpo es capaz de reconocer
Los anticuerpos monoclonales (mAb) son importantes reactivos utilizados en la investigación biomédica, en el diagnóstico de enfermedades y en el tratamiento de enfermedades como las infecciones y el cáncer.
- los mAb son producidos por líneas celulares o clones obtenidos de animales que han sido inmunizados con la sustancia objeto de estudio
- dos características de la relación anticuerpo-epítopo son clave para el uso de los anticuerpos monoclonales como herramienta molecular
- especificidad
- el anticuerpo sólo se une a su epítopo particular
- suficiencia
- el epítopo puede unirse al anticuerpo por sí solo, es decir, no es necesaria la presencia de toda la molécula de antígeno
- cada célula B de un organismo sintetiza un solo tipo de anticuerpo
- en un organismo, existe toda una población de diferentes tipos de células B y sus respectivos anticuerpos que se produjeron en respuesta a los diversos antígenos a los que el organismo había estado expuesto
- para que sea útil como herramienta, los biólogos moleculares necesitan cantidades sustanciales de un único anticuerpo (y sólo de ese anticuerpo)
- necesitan un método de cultivo de una población de células B derivadas de una única célula B ancestral, de modo que esta población de células B nos permita obtener un único tipo de anticuerpo
- esta población de células se describiría correctamente como monoclonaly los anticuerpos producidos por esta población de células B se denominan anticuerpos monoclonales (mAbs)
- contrasta con los anticuerpos obtenidos de la sangre de un animal inmunizado, que se denominan anticuerpos policlonales
- para producir el mAb deseado, las células deben cultivarse de una de estas dos formas
- mediante inyección en la cavidad abdominal de un ratón convenientemente preparado o mediante cultivo tisular de células en frascos de plástico
- El método del ratón
- es generalmente conocido, bien entendido y ampliamente disponible en muchos laboratorios; pero los ratones requieren una vigilancia cuidadosa para minimizar el dolor o la angustia que algunas líneas celulares inducen por la acumulación excesiva de líquido (ascitis) en el abdomen o por la invasión de las vísceras
- el método de cultivo de tejidos
- sería ampliamente adoptado si fuera tan familiar y bien comprendido como el método del ratón y si produjera la cantidad requerida de anticuerpo con cada línea celular; pero los métodos de cultivo han sido caros y han consumido mucho tiempo y a menudo no han producido la cantidad requerida de anticuerpo sin una considerable manipulación experta. Sin embargo, los métodos de cultivo son ahora menos costosos, más familiares y están más disponibles.
- podría ser necesario un procesamiento adicional del líquido ascítico de ratón y del sobrenadante del cultivo de tejidos para obtener mAb con la pureza y concentración requeridas