Types de tests d'anticorps

Technologie des immunodosages VIH

Les immunodosages IV basés sur différents principes de conception sont généralement regroupés en "générations" :

• 1ère génération et 2ème génération (indirecte) dosage immunoenzymatique lié au sorbant (ELISA)/dosage immunoenzymatique (EIA)
  • le plasma ou le sérum est ajouté à des puits recouverts d'antigènes contenant un lysat viral (tests de première génération) ou des protéines VIH recombinantes ou des peptides synthétiques (tests de deuxième génération)
    • si des IgG anti-VIH sont présentes dans l'échantillon, elles se lient aux antigènes. Une enzyme liée à l'anticorps IgG anti-humain est ensuite ajoutée au puits (qui se lie à l'IgG anti-VIH). Enfin, un réactif coloré est ajouté.
      • Un changement de couleur indique la présence d'IgG anti-VIH dans l'échantillon.
        
        
• ELISA "sandwich" de troisième génération
  • Le puits recouvert d'antigène contient des protéines recombinantes ou des peptides synthétiques. Si l'échantillon contient des anticorps IgG et IgM anti-VIH, ceux-ci se lieront à l'antigène.
    • une enzyme liée à l'antigène du VIH est introduite (plutôt qu'à l'anticorps anti-IgG) dans le puits, qui se lie aux IgG et IgM anti-VIH
    • un réactif coloré est ajouté et un changement de couleur indique la présence d'IgG et d'IgM anti-VIH dans l'échantillon.
  • utile pour la détection précoce de la réponse aux anticorps par rapport aux tests de première et de deuxième génération, car il détecte les IgM aussi bien que les IgG.
    
    
• ELISA "combiné" de 4e génération
  • les puits sont recouverts d'antigène VIH et d'anticorps p24
    • Les anticorps du VIH présents dans l'échantillon se lient à l'antigène tandis que les anticorps anti-p24 se lient au p24 libre.
    • lors de l'étape de détection enzymatique, l'antigène VIH et l'anticorps p24 liés à l'enzyme sont ajoutés
    • un changement de couleur après l'ajout du réactif coloré indique la présence de l'anticorps anti-VIH ou de l'antigène p24.
      • 2 étiquettes fluorescentes différentes peuvent être utilisées pour la détection indépendante de l'anticorps p24 ou de l'antigène VIH.
  • Par rapport aux tests précédemment disponibles, les EIA de 4e génération détectent les antigènes p24, ce qui permet une détection encore plus précoce de l'infection par le VIH (1).

Référence :

1. Centers for Disease Control and Prevention (Centres de contrôle et de prévention des maladies). Laboratory testing for the diagnosis of HIV infection : updated recommendations. Jun 2014 [publication sur internet].