Les anticorps sont des protéines produites par les lymphocytes B du système immunitaire en réponse à des protéines étrangères, appelées antigènes.
- les anticorps fonctionnent comme des marqueurs, se liant à l'antigène pour que les molécules d'antigène puissent être reconnues et détruites par les phagocytes
- la partie de l'antigène à laquelle l'anticorps se lie est appelée épitope
- courte séquence d'acides aminés que l'anticorps est capable de reconnaître.
Les anticorps monoclonaux (AcM) sont des réactifs importants utilisés dans la recherche biomédicale, dans le diagnostic des maladies et dans le traitement de maladies telles que les infections et le cancer.
- Les AcM sont produits par des lignées cellulaires ou des clones obtenus à partir d'animaux qui ont été immunisés avec la substance faisant l'objet de l'étude.
- deux caractéristiques de la relation anticorps-épitope sont essentielles à l'utilisation des anticorps monoclonaux en tant qu'outil moléculaire
- la spécificité
- l'anticorps se lie uniquement à son épitope particulier
- suffisance
- l'épitope peut se lier seul à l'anticorps, c'est-à-dire que la présence de la molécule d'antigène entière n'est pas nécessaire.
- chaque cellule B d'un organisme ne synthétise qu'un seul type d'anticorps
- dans un organisme, il existe toute une population de différents types de cellules B et leurs anticorps respectifs qui ont été produits en réponse aux différents antigènes auxquels l'organisme a été exposé.
- pour que cet outil soit utile, les biologistes moléculaires ont besoin de quantités substantielles d'un seul anticorps (et de cet anticorps seulement)
- ont besoin d'une méthode de culture d'une population de cellules B dérivées d'une seule cellule B ancestrale, de sorte que cette population de cellules B nous permette de récolter un seul type d'anticorps.
- cette population de cellules serait correctement décrite comme monoclonaleet les anticorps produits par cette population de cellules B sont appelés anticorps monoclonaux (AcM)
- Contrairement aux anticorps obtenus à partir du sang d'un animal immunisé, qui sont appelés anticorps polyclonaux.
- Pour produire l'anticorps monoclonal souhaité, les cellules doivent être cultivées de l'une ou l'autre des deux manières suivantes
- par injection dans la cavité abdominale d'une souris convenablement préparée ou par culture tissulaire de cellules dans des flacons en plastique.
- La méthode de la souris
- est généralement familière, bien comprise et largement disponible dans de nombreux laboratoires ; mais les souris doivent être surveillées attentivement afin de minimiser la douleur ou la détresse que certaines lignées cellulaires induisent par une accumulation excessive de liquide (ascite) dans l'abdomen ou par l'invasion des viscères.
- la méthode de culture de tissus
- serait largement adoptée si elle était aussi familière et bien comprise que la méthode de la souris et si elle produisait la quantité requise d'anticorps avec chaque lignée cellulaire ; mais les méthodes de culture ont été coûteuses et ont pris beaucoup de temps et n'ont souvent pas produit la quantité requise d'anticorps sans une manipulation qualifiée considérable. Cependant, les méthodes de culture deviennent aujourd'hui moins coûteuses, plus familières et plus largement disponibles
- un traitement supplémentaire du liquide ascitique de souris et du surnageant de culture tissulaire peut être nécessaire pour obtenir des AcM ayant la pureté et la concentration requises