Soorten testen op antilichamen

HIV immunoassay technologie

IV immunoassays gebaseerd op verschillende ontwerpprincipes worden over het algemeen gegroepeerd in "generaties":

• 1e generatie & 2 generatie (indirecte) enzyme linked immuno sorbent assay (ELISA)/enzyme immunoassays (EIA's)
  • plasma of serum wordt toegevoegd aan met antigeen gecoate wells die virale lysaten (assays van de eerste generatie) of recombinante HIV-eiwitten of synthetische peptiden (assays van de tweede generatie) bevatten
    • als er anti-HIV IgG in het monster aanwezig is, zal het aan de antigenen binden. Vervolgens wordt een enzym gekoppeld aan anti-humaan IgG-antilichaam aan de well toegevoegd (dat bindt aan het anti-HIV IG). Tot slot wordt een kleurreagens toegevoegd.
      • Een kleurverandering geeft de aanwezigheid van anti-HIV IgG in het monster aan.
        
        
• 3e generatie "sandwich" ELISA
  • De met antigeen gecoate well bevat recombinante eiwitten of synthetische peptiden. Als het monster anti-HIV IgG- en IgM-antilichamen bevat, zullen deze met het antigeen binden.
    • er wordt een enzym dat aan het HIV-antigeen is gekoppeld (in plaats van aan anti-IgG-antilichaam) in de well gebracht dat aan anti-HIV IgG en IgM bindt
    • een kleurreagens wordt toegevoegd en als er een kleurverandering optreedt, duidt dit op de aanwezigheid van anti-HIV IgG en IgM in het monster
  • nuttig bij de vroege opsporing van antilichaamrespons in vergelijking met tests van de 1e en 2e generatie, aangezien ze zowel IgM als IgG opsporen
    
    
• 4e generatie "combinatie" ELISA
  • De wells zijn gecoat met HIV-antigeen en p24-antilichaam.
    • HIV-antilichamen in het monster binden aan het antigeen, terwijl anti-p24-antilichamen zich binden aan het vrije p24
    • in de enzymdetectiestap wordt zowel enzymgekoppeld hiv-antigeen als enzymgekoppeld p24-antilichaam toegevoegd
    • een kleurverandering na toevoeging van het kleurreagens duidt op de aanwezigheid van anti-HIV-antilichaam of p24-antigeen
      • er kunnen 2 verschillende fluorescentielabels worden gebruikt voor onafhankelijke detectie van p24-antilichaam of hiv-antigeen.
  • in vergelijking met eerder beschikbare assays detecteren 4e generatie EIA's p24-antigenen, waardoor HIV-infectie nog eerder kan worden opgespoord (1)

Referentie:

1. Centers for Disease Control and Prevention. Laboratoriumtests voor de diagnose van hiv-infectie: bijgewerkte aanbevelingen. Jun 2014 [internetpublicatie].