Aislar el ADN

Un problema frecuente en ingeniería genética es cómo aislar mejor secuencias de ADN de mezclas complejas. Existen varios enfoques:

• Crear una biblioteca de ADN. Esto implica utilizar una enzima endonucleasa de restricción para seccionar el ADN genómico en muchos fragmentos que se introducen en vectores. A continuación, los vectores se amplifican de forma independiente.
  
  
• Crear una biblioteca de ADN complementaria. El ARN mensajero de un tejido de interés se convierte en ADNc mediante una enzima transcriptasa inversa. El ADNc se transforma en ADN mediante una enzima polimerasa antes de la clonación final. Por lo general, el ADNc será diferente del ADN del que procede originalmente, ya que se ha producido indirectamente a partir de ARNm sin intrones, es decir, ha sido sometido a una modificación postraduccional.
  
  
• sintetizar una sonda de oligonucleótidos. Para ello es necesario conocer la secuencia de aminoácidos de todo o parte del producto proteínico investigado. La sonda se fabrica a partir de pares de bases que serían necesarios como molde para la proteína postulada. La sonda marcada radiactivamente es capaz de unirse a su secuencia complementaria entre una biblioteca de alternativas.