DNA-segmenten kunnen worden geïdentificeerd aan de hand van het verschil tussen basenparen op een chromosomenpaar. Deze verschillen kunnen zo klein zijn als één basenpaar op vijfhonderd, maar zijn voldoende om een restrictie-enzym een andere plaats voor DNA-splitsing te geven. Bijgevolg worden na vertering nieuwe DNA-fragmenten van verschillende lengte en samenstelling geproduceerd.
De fragmenten worden gescheiden op basis van moleculair gewicht door middel van agarosegelelektroforese. Het DNA wordt vervolgens gedenatureerd tot enkelstrengs moleculen. Deze worden overgebracht op nitrocellulosepapier dat DNA bindt. De positie van de enkelstrengs DNA-moleculen op het vloeipapier komt precies overeen met hun oorspronkelijke positie op de gel. Vervolgens wordt een volledig gekarakteriseerde gensonde gebruikt om te binden aan complementaire regio's van interesse. Het patroon dat de probe opneemt, zoals onthuld door contrasttechnieken zoals autoradiografie, geeft het DNA-segment aan waarbinnen het gen van interesse zich bevindt. Als de sonde bestaat uit complementair DNA van gedenatureerd DNA, wordt het hele proces Southern blotting genoemd. Er bestaan ook technieken voor het gebruik van probes voor RNA - Northern blotting - en eiwitten - Western blotting.
De aanwezigheid van verschillende fragmenten kan samen met een stamboom worden gebruikt om vast te stellen welk deel van een chromosoom drager is van een afwijkend gen. Het DNA-fragment wordt gebruikt als een marker voor genen op zijn plaats die zich hebben gemanifesteerd in het genotype van een familie.
Gerelateerde pagina's
Maak een account aan om paginanotities toe te voegen
Voeg informatie toe aan deze pagina die handig is om bij de hand te hebben tijdens een consult, zoals een webadres of telefoonnummer. Deze informatie wordt altijd weergegeven wanneer je deze pagina bezoekt