Anticorpo monoclonal

Os anticorpos são proteínas produzidas pelos linfócitos B do sistema imunitário em resposta a proteínas estranhas, denominadas antigénios

• os anticorpos funcionam como marcadores, ligando-se ao antigénio para que as moléculas do antigénio possam ser reconhecidas e destruídas pelos fagócitos
• a parte do antigénio a que o anticorpo se liga é chamada epítopo
  • uma sequência curta de aminoácidos que o anticorpo é capaz de reconhecer

Os anticorpos monoclonais (mAb) são reagentes importantes utilizados na investigação biomédica, no diagnóstico de doenças e no tratamento de doenças como as infecções e o cancro

• Os mAb são produzidos por linhas celulares ou clones obtidos a partir de animais que foram imunizados com a substância que é objeto de estudo
  • duas caraterísticas da relação anticorpo-epítopo são fundamentais para a utilização dos anticorpos monoclonais como ferramenta molecular
    • especificidade
      • o anticorpo liga-se apenas ao seu epítopo específico
    • suficiência
      • o epítopo pode ligar-se ao anticorpo por si só, ou seja, não é necessária a presença de toda a molécula de antigénio
        
        
  • cada célula B de um organismo sintetiza apenas um tipo de anticorpo
    • num organismo, existe toda uma população de diferentes tipos de células B e os respectivos anticorpos que foram produzidos em resposta aos vários antigénios a que o organismo foi exposto
    • para ser útil como ferramenta, os biólogos moleculares precisam de quantidades substanciais de um único anticorpo (e apenas desse anticorpo)
      • necessitam de um método de cultura de uma população de células B derivadas de uma única célula B ancestral, de modo a que esta população de células B nos permita colher um único tipo de anticorpo
        
        • esta população de células seria corretamente descrita como monoclonale os anticorpos produzidos por esta população de células B são designados anticorpos monoclonais (mAbs)
          • contrasta com os anticorpos obtidos a partir do sangue de um animal imunizado, que são designados anticorpos policlonais
• Para produzir o mAb desejado, as células devem ser cultivadas de uma de duas formas:
  • por injeção na cavidade abdominal de um rato devidamente preparado ou por cultura de células em frascos de plástico
    • método do ratinho
      • é geralmente familiar, bem compreendido e amplamente disponível em muitos laboratórios; mas os ratos requerem uma observação cuidadosa para minimizar a dor ou o sofrimento que algumas linhas celulares induzem por acumulação excessiva de líquido (ascite) no abdómen ou por invasão das vísceras
    • o método de cultura de tecidos
      • seria amplamente adotado se fosse tão familiar e bem compreendido como o método do ratinho e se produzisse a quantidade necessária de anticorpos com cada linha celular; mas os métodos de cultura têm sido dispendiosos e demorados e, muitas vezes, não conseguem produzir a quantidade necessária de anticorpos sem uma manipulação especializada considerável. No entanto, os métodos de cultura estão agora a tornar-se menos dispendiosos, mais familiares e mais amplamente disponíveis
        
        
• poderá ser necessário um processamento adicional do líquido ascítico do rato e do sobrenadante da cultura de tecidos para obter mAb com a pureza e concentração necessárias