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Clonagem de ADN

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A clonagem de ADN, a produção de uma ou mais cópias de um gene ou genes, pode ser efectuada de várias formas.

Um método consiste em isolar o gene necessário e depois inseri-lo num vetor, como um vírus bacteriano, através de uma técnica denominada ligação, utilizando uma enzima ligase. O vetor com o novo gene replica-se com o ADN do hospedeiro quando colocado numa célula bacteriana hospedeira, como a E. coli. A técnica de colocação de ADN estranho na bactéria é designada por transformação ou transfecção. O ADN do vetor é então isolado do caldo hospedeiro, o gene necessário é excisado utilizando enzimas de restrição e, finalmente, é isolado e purificado por eletroforese.

Um método alternativo de clonagem de ADN é a reação em cadeia da polimerase (PCR).


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