Este diagnóstico é efectuado através de um teste de fixação do complemento, um teste de aglutinação de Schuffer, anticorpos contra a Leptospira e uma cultura de sangue, urina e LCR.
A cultura de Leptospira pode ser feita na primeira semana de infeção, mas durante a segunda semana a cultura de sangue é negativa. Os testes serológicos tornam-se positivos na segunda semana.
As culturas de urina podem ser positivas após cerca de duas semanas. A Leptospira sobrevive melhor em urina alcalina.
A leucocitose polimorfonuclear é geralmente observada na leptospirose.
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