Teste de urina da bexiga GALEAS e biomarcadores de metilação para o cancro da bexiga

GALEAS é um ensaio não invasivo de biomarcadores urinários que utiliza sequenciação de última geração (NGS) ultra-profunda e direcionada para detetar mutações genéticas somáticas num painel de 23 genes associados ao cancro urotelial da bexiga (BC) (1):

• tem como objetivo servir de ferramenta de triagem molecular nos percursos de avaliação de hematúria urgente e na vigilância pós-ressecção do cancro da bexiga não invasivo do músculo (NMIBC), de modo a reduzir com segurança a dependência da cistoscopia flexível invasiva
• utiliza identificadores moleculares únicos (UMIs) para eliminar falsos positivos decorrentes de artefactos de sequenciação ou hematopoiese clonal, permitindo a deteção fiável de variantes de nucleótido único (SNVs) de baixa frequência

Principais conclusões clínicas

Desempenho diagnóstico do GALEAS apenas para a bexiga

• elevada precisão global: atinge cerca de 92% de sensibilidade e cerca de 89% a 92% de especificidade na avaliação clínica da hematúria
• Detecção de doença de alto grau: deteta mais de 96% a 97% dos cancros da bexiga de alto grau e invasivos muscularmente, proporcionando um elevado valor preditivo negativo (VPN > 99%) para excluir doença agressiva
• Ampla cobertura tecidular: o painel específico analisa mutações somáticas presentes em cerca de 96% de todos os tumores uroteliais primários da bexiga

Valor da adição de marcadores de metilação ao painel (2)

• hipótese testada: os investigadores analisaram se a adição de um painel epigenético (23 loci de ADN hipermetilados) poderia identificar casos falso-negativos não detetados pelo teste de mutações
• Resultado do estudo: a adição de marcadores de metilação não proporcionou qualquer benefício diagnóstico clínico adicional, mantendo-se a sensibilidade global combinada inalterada em cerca de 93%
• Elevada concordância: os marcadores de mutação e de metilação apresentaram elevada concordância (~85%), e todas as amostras de urina da bexiga GALEAS com resultados falso-negativos também se revelaram completamente negativas para os marcadores de metilação

Conclusão principal para a prática clínica

• Causa dos falsos negativos:
  • os resultados falsos negativos do ADN na urina não são causados pela ausência de alvos de mutação; em vez disso, ocorrem quando tumores de baixo grau ou pequenos libertam muito poucas células malignas na urina (baixa fração de células tumorais)
• limite máximo de diagnóstico:
  • uma vez que tanto as mutações de ADN como os marcadores de metilação desaparecem quando faltam células tumorais libertadas, a adição de marcadores epigenéticos adicionais não consegue superar o limite físico da baixa libertação de células

Referências

1. Ward DG, Baxter L, Ott S, Gordon NS, Wang J, Patel P, Piechocki K, Silcock L, Sale C, Zeegers MP, Cheng KK, James ND, Bryan RT. Detecção altamente sensível e específica do cancro da bexiga através do sequenciamento ultra-profundo direcionado do ADN urinário. European Urology Oncology. 2023;6(1):67-75.
2. Gordon NS, McGuigan EK, Ondasova M, Knight J, Baxter LA, Ott S, Hastings RK, Zeegers MP, James ND, Cheng KK, Goel A, Yu M, Arnold R, Bryan RT, Ward DG. Comparação e combinação de testes de urina baseados em mutações e metilação para a deteção do cancro da bexiga. Biomarker Research. 2024;12(1):133.